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    B6-PD1tm1小鼠,動物試驗

    原創發布者:北檢院    發布時間:2023-02-27     點擊數:

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    基本信息

    品系名稱:B6-PD1tm1小鼠

    英文名稱:B6-PD1tm1

    疾病名稱:免疫缺陷疾病

    相關基因:PD1

    背景品系:C57BL/6J小鼠

    遺傳類型:基因敲除近交系

    繁殖方式:HOM X HOM

    繁殖代數:6代

    研究用途:用于PD-L/PD1信號通路對腫瘤生長影響的研究。

    飼養環境:屏障設施

    培育單位:北京華阜康生物科技股份有限公司

    保種單位:北京華阜康生物科技股份有限公司

    資源鑒定:已通過實驗動物模型鑒定與評價工作委員會鑒定

    鑒定日期:2020-04-29 00:00:00

    特征描述

    PD1小鼠是北京華阜康生物科技股份有限公司自主研發的免疫模型小鼠,在小鼠的基因組敲除PD-1,構建的PD-L/PD1腫瘤信號通路研究的模型動物。 PD-1(programmed death 1)程序性死亡受體1,是T細胞表面的CD28家族的一個重要的負性共刺激分子。它通過和其配體程序性死亡因子配體-1/2(programmed death ligand-1/2,PD-L1/2)結合后負性調節免疫反應并維持外周免疫耐受,其最初是從凋亡的小鼠T細胞雜交瘤2B4.11克隆出來。PD-1 可誘導表達于活化的 T 細胞、B細胞、NK-T細胞以及激活的單核細胞表面。以PD-1為靶點的免疫調節對抗腫瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植存活等均有重要的意義。其配體PD-L1也可作為靶點,相應的抗體也可以起到相同的作用。為了更加深入的探究PD-1基因在動物機體抵抗病毒感染的機制研究,最好的方式是建立該基因修飾動物模型作為研究工具

    動物簡介

    PD1小鼠是通過CRISPR-Cas9技術對在C57BL/6J背景的PD-1基因敲除而獲得純合突變小鼠。

    營養成分

    粗蛋白≥23.0%、粗脂肪≥5.0%、粗灰分≤7.0%、粗纖維≤5.0%、水份≤10%、鈣1.4%~1.5%、磷1.0%~1.1%、賴氨酸≥1.32%、蛋氨酸+胱氨酸≥0.78%

    生物學特性

     

    1. 生長曲線

    2、解剖學特性與背景品系C57BL/6J相同。3、繁殖特性純合子之間同胞兄妹間繁殖,繁殖能力一般,每胎產5-7只。4、自發異常

    不規則脾 脾臟黑色素沉積

     

     

    遺傳信息

    1、 PD-1 KO小鼠的制備背景小鼠C57BL/6J為近交系小鼠,是經過全基因組測序的小鼠,具有實驗結果精度高、可比性好、應激反應均一等特點,是基因工程小鼠常用品系。基因設計信息Pdcd1 programmed cell death 1 [ Mus musculus (house mouse) ],Gene ID: 18566

     

    2、 敲除設計設計敲除第二,三外顯子。3、作用靶點設計GGAACATCTTGAACAGGAGTGGGM- PD1-EA1-gRNA up: TAGGAACATCTTGAACAGGAGTM- PD1–EA1-gRNA down: AAACACTCCTGTTCAAGATGTTGGAAGAGCCCTGCTTGTTGGAGGM- PD1-EA2-gRNA up: TAGGAAGAGCCCTGCTTGTTGGM- PD1–EA2-gRNA down: AAACCCAACAAGCAGGGCTCTTGGAACTCCCCGTTAGTAAATGGGM- PD1-EB1-gRNA up: TAGGAACTCCCCGTTAGTAAATM- PD1–EB1-gRNA down: AAACATTTACTAACGGGGAGTTGGGAGGACATTCCTCCACTAGGGM- PD1-EB2-gRNA up: TAGGGAGGACATTCCTCCACTAM- PD1–EB2-gRNA down: AAACTAGTGGAGGAATGTCCTC4.顯微注射和基因型鑒定4.1顯微注射①超數排卵:150只3-4周齡c57雌鼠注射激素進行超排。②受精卵注射:取約350枚受精卵進行注射。③雄鼠結扎:制作30只8周齡輸精管結扎的c57雄鼠。④受體鼠制備:8-10周齡ICR雌鼠與結扎的ICR雄鼠交配后選取見栓的雌鼠。⑤胚胎移植:將注射后的受精卵移植到受體鼠輸卵管壺腹部(移植一次, 350枚卵,15只受體鼠)。4.2 F0代小鼠基因鑒定引物:M-PD1-F1: CACTCCCACCTCACTATCCCACT 63.8M-PD1-R1: ACCAGAGTGTCGTCCTTGCTTC 63 WT=1819bp 經過基因型鑒定獲得2只敲除小鼠(#1, #4)。

     

    #1 del 492bp

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    #4 del 1357 bp 留 ,繁殖一代

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    實驗儀器

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    測試流程

    B6-PD1tm1小鼠流程

    注意事項

    1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

    2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

    3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

    4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

    5.如果對于(B6-PD1tm1小鼠,動物試驗)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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